手性柱為什么會出現拖尾?每個實驗員的實驗生涯,總會遇到那么n次色譜峰拖尾。那么色譜峰為什么會拖尾呢?是柱子壞了?還是操作失誤?下面就一起來看看那吧!
1、柱物理損壞
色譜柱有物理損壞是造成峰形拖尾的根源。唯一的解決方法就是更換新柱。
2、柱內填料污染
流動相和樣品中的雜質是色譜柱主要污染源。
流動相所用的各種溶劑至少是分析純,盡量使用色譜純試劑。流動相所用的水要是超純水或全玻璃器皿雙蒸水。用前先用0.45um溶劑微孔過濾(器)過濾,除去可能存在的微粒。流動相建議現用現配,對于含鹽的溶液尤其注意長置會產生細菌或出現沉淀。此外還得保證儲存流動相的容器清潔。
3、柱進口處有異物
當斷定是柱進口處有異物時,可將柱頭螺絲卸下,取出濾帽并將其置于20%硝酸溶液中,用超聲波清洗約20分鐘,再置于超純水中,并用超聲波清洗約10分鐘,重新裝入色譜柱內即可。
4、樣品濃度過高致使柱超載
樣品在柱上超載能引起峰展寬,拖尾(或伸舌)。
適當減小進樣量或樣品濃度(需要時,可提高檢測器靈敏度)直至峰形和保留時間不再改變,便可消除這種不良影響。減小進樣量還能改善其分離度。正常情況下,樣品中每種化合物在150×4.6mm柱中進樣量保持在3~50ug范圍內,不會引起明顯超載。
5、柱外效應
柱外效應(即進樣閥、色譜柱及檢測器間的管路過長、直徑過粗、管路接頭不匹配、有死體積)是影響色譜柱柱效的主要因素之一。所以在可能的條件下,色譜柱的兩端連接管路要盡可能短,連接管內徑盡可能細小,切口務必平整光滑,盡可能的減小死體積,以防止因樣品擴散造成不能反映色譜柱真實柱效等情況發(fā)生。
6、緩沖不足或不合適
在緩沖不好或離子強度過低的分離中,也會出現保留時間重現性差和峰形拖尾。增加緩沖濃度(與樣品大小相匹配)能改善此情況。
希望大家看到這里,以后遇到峰拖尾時能有一定的排查方向,若不能解決的,便及時與經銷商或廠家溝通,配合排查。
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