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流動(dòng)相溶劑瓶的保養(yǎng) 溶劑瓶是流動(dòng)相的起點(diǎn),通常是盛放水相溶液或是有機(jī)相溶液。 水相溶液 有機(jī)相溶液 清洗過(guò)濾 高壓泵的保養(yǎng) 泵是液相色譜的核心,泵將流動(dòng)相從溶劑瓶輸送到液相流路系統(tǒng)中,并要在高壓下保持流量和壓力的穩(wěn)定。狀態(tài)正常的高壓泵是液相色譜準(zhǔn)確分析的基礎(chǔ),所以平日一定要重視對(duì)泵的維護(hù)。 泵壓力波動(dòng) 很多情況下,泵的問(wèn)題反映在壓力上,壓力波動(dòng)又是常見的一類問(wèn)題。通常我們可以通過(guò)重新清洗流路和再次脫氣流動(dòng)相加以解決。 過(guò)濾頭保養(yǎng) 在泵的維護(hù)里還有一項(xiàng)常做的工作就是更換清洗閥上的過(guò)濾頭,通常判斷的標(biāo)準(zhǔn)是純水以5mL/min流速清洗的時(shí)候,如果壓力超過(guò)1MPa則考慮更換。 進(jìn)樣器的保養(yǎng) 進(jìn)樣器分手動(dòng)和自動(dòng)兩大類,雖然兩者工作模式不同,但使用的要點(diǎn)是基本一致的。 圖片來(lái)源于網(wǎng)絡(luò),侵刪 防止交叉污染 自動(dòng)進(jìn)樣器常見的問(wèn)題是交叉污染,交叉污染產(chǎn)生的原因很直接,樣品殘留在進(jìn)樣針內(nèi)外表面,并隨下一次進(jìn)樣進(jìn)入色譜系統(tǒng)。要解決交叉污染,主要靠清洗。 精細(xì)操作 手動(dòng)進(jìn)樣器的操作要點(diǎn)大致相同,應(yīng)使用液相色譜專用進(jìn)樣針,進(jìn)樣時(shí)插針應(yīng)插到底,不使用時(shí)將針頭留在進(jìn)樣器內(nèi),使用前后都要及時(shí)清洗。 色譜柱的保養(yǎng) 色譜柱是化合物分離的關(guān)鍵。保養(yǎng)良好的色譜柱具有很高的塔板數(shù),且儀器基線平穩(wěn)。 避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng) 溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料,因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行,在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過(guò)緩(如前所述)。 應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成 特別是反相色譜中,不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬?,反之亦然?/span> 選擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是pH) 以此避免固定相被破壞。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一預(yù)柱,分析柱是鍵合硅膠時(shí),預(yù)柱為硅膠,可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。 對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理或使用保護(hù)柱 避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi),需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護(hù)柱。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。 檢測(cè)器的保養(yǎng) 光源部分檢測(cè)器 光源部分檢測(cè)器中非常重要的部件是光源,光源對(duì)發(fā)射能量有要求,一旦能量衰減到一定程度,就會(huì)出現(xiàn)基線噪聲變大,靈敏度降低等一系列影響使用的問(wèn)題,因此光源是一個(gè)消耗品。通常紫外燈的壽命是2000h,當(dāng)?shù)竭_(dá)這個(gè)時(shí)限的時(shí)候,我們就要特別關(guān)注燈的能量狀況,可以通過(guò)儀器維護(hù)軟件中自帶的“燈能量測(cè)試”功能來(lái)判斷,測(cè)試的結(jié)果會(huì)分別評(píng)估低、中、高三個(gè)波長(zhǎng)段的能量,一旦某個(gè)波長(zhǎng)段的測(cè)試結(jié)果顯示失敗,就表示需要更換燈。 檢測(cè)池檢測(cè)器 檢測(cè)池檢測(cè)器中另一個(gè)重要部件是檢測(cè)池,也叫流通池。通常大家關(guān)心的一個(gè)問(wèn)題是檢測(cè)池被堵掉,因?yàn)闄z測(cè)池通常不是很耐壓,所以一旦被堵就很可能造成損壞。事實(shí)上檢測(cè)池通常不太容易被堵,原因是幾乎所有的顆粒雜質(zhì)都會(huì)被色譜柱攔下了,所以堵塞檢測(cè)器的東西基本都不是來(lái)自樣品的,很可能是后來(lái)“產(chǎn)生”的,比如含鹽流動(dòng)相殘留在檢測(cè)池中導(dǎo)致鹽析出。 廢液的處置 HPLC的廢液大部分含有有機(jī)溶劑,會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生一定的危害,對(duì)環(huán)境也會(huì)產(chǎn)生污染,嚴(yán)禁隨意傾倒,應(yīng)及時(shí)處理。目前,國(guó)內(nèi)大部分實(shí)驗(yàn)室是將廢液送到專門的廢液處理站集中進(jìn)行無(wú)害化處理。
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