色譜保留時間飄忽不定，如何破案？

液相色譜保留時間總是飄忽不定，令人難以琢磨。根據(jù)經(jīng)驗，色譜保留時間不重現(xiàn)分為兩種情況：一是保留時間單方向的漂移，即保留時間提前或延后；二是保留時間無規(guī)律的波動，即保留時間忽前忽后。

介紹色譜保留時間漂移前，我們先來了解與區(qū)分保留時間、死時間、調(diào)整保留時間的概念：

調(diào)整保留時間=保留時間-死時間

※在實驗室條件下（溫度、固定相等）一定時，調(diào)整保留時間僅決定于組分的性質(zhì)，因此調(diào)整保留時間是定性的基本參數(shù)。

那液相色譜中保留時間為何忽前忽后呢？下面我們來說說主要的影響因素及“破案”方法。

若發(fā)生保留時間漂移，需要考慮流動相是否已使色譜柱達(dá)到充分的平衡。一般情況下，流動相平衡色譜柱需要10-20個柱體積；但如果流動相中有使用弱酸、弱堿、緩沖鹽和離子對試劑，或者固定相為正相硅膠等，則需要更長的時間來平衡色譜柱。

這時也可能會導(dǎo)致保留時間的漂移，需要同時觀察色譜峰型、柱效、壓力的變化情況，推測色譜柱是否被污染?？梢愿鶕?jù)具體的測試條件來選擇適當(dāng)?shù)娜軇┻M(jìn)行色譜柱的沖洗，或更換新的色譜柱。為了延長色譜柱的使用壽命，增加保護(hù)柱是非常有效的方法。

確認(rèn)柱溫的準(zhǔn)確性，柱溫的變化也會導(dǎo)致保留時間的變化。

流動相中某種試劑的揮發(fā)，流動相中不同試劑的比例配制有誤，也會導(dǎo)致保留時間的變化，需要確認(rèn)流動相是否新鮮與正確。

觀察柱前壓力，如果壓力不穩(wěn)定或者偏離正常值，可能是泵流速不準(zhǔn)確或者有氣泡產(chǎn)生，出現(xiàn)保留時間的不穩(wěn)定，需要保證儀器流速的準(zhǔn)確性與穩(wěn)定性。

觀察系統(tǒng)壓力，如果幾次進(jìn)樣的壓力曲線不能重合或差別比較大，可能是系統(tǒng)存在泄露或堵塞，出現(xiàn)保留時間的不穩(wěn)定，需要依次排查系統(tǒng)中有無漏液或堵塞異常。

保持保留時間的重復(fù)性是重中之重！同時，也要盡可能避免保留時間的漂移！關(guān)注保留時間的穩(wěn)定性也能反映流動相、檢測器等的正常情況！