色譜柱操作時常見的問題

　　在我們實驗室中色譜柱的使用一直是非常重要的，而色譜柱的使用需要一定的知識儲備，如果對于色譜柱的使用不了解的話，就很容易出現(xiàn)各種問題，影響實驗的進(jìn)程，那么下面就來看看那色譜柱操作時常見的問題吧！

　　1、裝柱

　　柱子下面的活塞一定不要涂潤滑劑，會被淋洗劑帶到產(chǎn)品中的，可以采用四氟節(jié)門的。干法和濕法裝柱覺得沒什么區(qū)別，只要能把柱子裝實就行。裝完的柱子應(yīng)該要適度的緊密（太密了淋洗劑走的太慢），一定要均勻（不然樣品就會從一側(cè)斜著下來）。

　　書中寫的都是不能見到氣泡，我覺得在大多數(shù)情況下有些小氣泡沒太大的影響，一加壓氣泡就全下來了。當(dāng)然如果你裝的柱子總是有氣泡就說明需要多練習(xí)了。但是柱子更忌諱的是開裂，甭管豎的還是橫的，都會影響分離效果，甚至作廢！

　　2、加樣

　　用少量的溶劑溶樣品加樣，加完后將下面的活塞打開，待溶劑層下降至石英砂面時，再加少量的低極性溶劑，然后，再打開活塞，如此兩三次，一般石英砂就基本是白色的了。加入淋洗劑，一開始不要加壓，等溶樣品的溶劑和樣品層有一段距離（2～100px就夠了），再加壓，這樣避免了溶劑（如，二氯甲烷等）夾帶樣品快速下行。

　　3、淋洗劑的選擇

　　感覺上要使所需點在Rf0.2~0.3左右的比較好。不要認(rèn)為在板上爬高了分的比較開，過柱子就用那種極性，如果Rf在0.6，即使相差0.2也不容易在柱子上分開，因為柱子是一個多次爬板的狀態(tài)。