氨基柱的使用方法有哪些？

　　液相色譜柱的固定相可以說是五花八門，有C18，C8，C4，苯基柱，氰基柱，氨基柱等等。色譜柱使用的好壞，直接關(guān)系到分析分離的結(jié)果，我們都知道氨基柱有使用壽命短等問題，今天在這里給大家?guī)戆被氖褂弥改?，讓我們手中的色譜柱發(fā)揮出更大的作用。

　　1、由于新的氨基柱保存在正己烷-乙腈（99：1）中，與反相流動(dòng)相是不互溶的，因此如果使用反相的方法，必須用至少10倍柱體積的異丙醇沖洗過渡（約2h，0.5mL/min），以除去正相保存溶液。過渡過程中注意因異丙醇粘度較大，會(huì)導(dǎo)致柱壓很高，適當(dāng)調(diào)低流速即可。

　　2、再用至少10倍柱體積95％水-5％乙腈（或甲醇）沖洗（不含緩沖鹽的流動(dòng)相可省去）過渡，后用流動(dòng)相平衡。

　　3、用完后洗柱時(shí)，必須先用95％水沖洗至少10倍柱體積，除去所用緩沖鹽（不含緩沖鹽的流動(dòng)相可省去）。然后保存于乙腈/水（80：20）溶液（一個(gè)月內(nèi)）中。長期不用的話，建議用異丙醇保存（一個(gè)月以上）。

　　4、新柱子一定要置換掉保存溶液，用異丙醇保存的柱子在使用前也需要花一定的時(shí)間給置換掉。

　　5、反相條件下使用時(shí)，要特別注意控制pH值范圍（根據(jù)你色譜柱耐受使用pH），pH值越低越有發(fā)生水解的危險(xiǎn)，流動(dòng)相中水的比例越高當(dāng)然也越有發(fā)生水解的危險(xiǎn)。

　　6、還有一種情況是，當(dāng)使用氨基柱進(jìn)行酸性物質(zhì)的分析時(shí)，酸性物質(zhì)的存在意味著質(zhì)子的存在，可能會(huì)使略帶負(fù)電荷的氨基官能團(tuán)質(zhì)子化，導(dǎo)致使用一段時(shí)間后對(duì)于某些類的分析物保留性質(zhì)有所改變或表現(xiàn)在柱效下降。---------建議用10-15倍的柱體積的為pH=11 NH3的乙腈-水(50:50)溶液沖洗該柱（沖洗后當(dāng)然要再用不含堿的流動(dòng)相洗去多余氨），之后再進(jìn)行分析這類酸性分析物時(shí)建議在流動(dòng)相中略微添加少許氨如0.1％。